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腦膜炎黃桿菌PCR檢測試劑盒說明書

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腦膜炎黃桿菌PCR檢測試劑盒說明書

樣本處理及要求:

1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

3.組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織弄碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

樣本:血清 血漿 組織勻漿等液體樣本

標記物:血清 血漿 組織勻漿等

應用:僅用科研實驗檢測定量,定性檢

檢測方法:夾心法

技術要求:全程按說明書步驟檢測,操作規(guī)范,專業(yè),儀器設備齊全。

規(guī)格:48t/96t 

性狀:液體 

運輸方式:快遞發(fā)貨 

有效期:6個月

特點:靈敏性高,---性,吸附均勻,吸附性好,回收利用率高,是一款可以讓您放心選購的產(chǎn)品。

使用范圍:此產(chǎn)品供科研實驗使用,不得用于---。

用途:用于測定人血清、血漿、組織及相關液體樣本中的含量或活性。

試劑盒組成:

試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴增試劑,具體組成參見表 1:s

表 1:試劑盒組成(50test/盒)

組成成分.png

試劑盒組成及試劑配制:

1.酶聯(lián)板(Assay plate):一塊(96孔)。 

2.標準品(Standard):2瓶(凍干品)。

3.樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶

4.shengwusu標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5.辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6.shengwusu標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7.辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 

9.濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 

10.終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

特點優(yōu)勢:

   1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。

   2.重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。

   3.靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。

   4.實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。

   5.優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

   6.優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。

注意事項:

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

2.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zuihao控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

3.請每次測定的同時做標準曲線,zuihao做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請避光保存。

6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

8.本試劑不同批號組分不得混用。

9.不能使用過期產(chǎn)品。

10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

每個樣品測試反應體系配制見下表2。

表 2 每個樣品測試反應體系配制表

反應體系配制表.png

注:本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。

 

 

 


 
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